怎么用Kromasil系列液相色譜柱怎么分析復雜樣品?
點擊次數:955 更新時間:2022-08-29
Kromasil系列液相色譜柱是色譜分析過程中重要的部分,相當于人體的“心臟”。根據自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。
即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
Kromasil系列液相色譜柱效率與柱半徑平方成反比,內徑越小柱效越高,但內徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時,則因柱內每塊理論板內不能建立平衡,將會導致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現性不好。
因此對于復雜樣品需要準確分離,要使用小內徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就要使用內徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內徑一般是4.6mm。
長度的選擇:柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長,實驗室一半以上的工作都是采用此規格柱子,一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應用,—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質的復雜樣品程序升溫分析。
現代液相色譜分析中,色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發所需的時間,并且使方法更具穩定性。但是現在市場上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對象不同,因此,要做合適的選擇,要對此有一定的認識和了解。